
实时荧光定量PCR仪校准服务,1台ABI7500,4台AGS4800
ABI7500
温度控制系统验证
· 验证加热模块温度范围(4.0-99.9℃)的精度(±0.25℃)及升降温速率(平均1℃/秒),需使用专业测温仪检测孔间温度均匀性。
· 校准半导体控温系统(Peltier)的循环稳定性和重复性,确保热盖压力与温度匹配以减少蒸发干扰。
荧光检测系统校准
· 五色荧光通道(FAM/SYBR Green I、VIC/JOE、NED/TAMRA/Cy3、ROX/Texas Red、Cy5)的分光能力校正,检测激发/发射光谱的干扰及多色荧光同步捕捉灵敏度。
AGS4800
高通量模块性能验证
· 针对48/96/144孔板配置,验证样本加载同步性及孔间温度均匀性(温差≤0.3℃),确保三个独立进样系统的协同稳定性。
· 测试半导体热控模块的升降温速率(≥6.5℃/s)及温度范围(9-100℃)的精度(±0.25℃)。
荧光检测系统校准
· 校正多通道荧光检测的光谱干扰,验证激发/发射波长对不同试剂(如SYBR Green、探针法)的兼容性。
· 检查自动热盖对荧光基线信号的影响,确保热盖压力均匀性以避免蒸发干扰。
自动化与软件功能验证
· 校准无线远程控制模块的实时数据传输可靠性,验证自动预警系统对实验室污染的敏感性(如阳性检出率分析)。
· 测试快速循环程序的温度切换精度,确保多模块检测系统的数据一致性(CV值≤2%)。
硬件性能测试
· 使用标准荧光染料(如ROX参比)验证荧光信号线性范围(10^1-10^10 copies/μL)及灵敏度(单拷贝检测能力)。
· 通过外部测温仪校准模块温度均匀性,重点关注96孔板边缘与中心区域的温差控制。
软件与数据分析验证
· 运行预设程序(如新冠核酸检测协议),验证软件对多项目(乙肝DNA、EBV DNA等)并行检测的兼容性。
· 检查实时扩增曲线与阈值设定(Cq值)的匹配精度,确保定量结果与标准品浓度梯度的一致性。
维护与优化建议
· 清洁光电系统的滤光片及透镜组件,检查散热风扇与半导体控温模块的散热效率。
· 建议每6个月校准一次(高强度使用场景),或每年一次(常规实验室)
· 验证CCD成像系统的信号线性范围和最低检测限(支持单拷贝核酸分子检测)。
软件功能与数据分析
· 检查实时分析模块(如基因表达定量、等位基因分型)的算法准确性,确保多组分光谱补偿功能正常运行。
· 校准ROX参比荧光,消除反应孔间的光学误差和机械位移误差。
标准品对照与性能验证
· 使用梯度稀释的已知浓度标准品(如质粒DNA或RNA)验证定量线性范围(9个数量级动态范围)及重复性(CV值≤3%)。
· 执行阴性/阳性对照测试,验证仪器对污染或交叉反应的识别能力。
维护与配套服务
· 检查卤钨灯寿命、滤光片清洁度及机械传动部件状态,必要时更换老化配件。
· 同步升级仪器固件至最新版本,确保与QuantStudio或SDS分析软件的兼容性。
校准服务流程优化
· 优先选择具备原厂认证资质的服务商,确保校准设备(如ABI7500/Q5测温仪)符合ISO/IEC 17025标准。
· 采用分阶段实施策略:首轮校准后间隔24小时复测关键参数(如温度稳定性、荧光基线噪声)。
· 服务周期:常规校准建议每12个月一次,高强度使用(日均运行≥10次)缩短至6个月。
· 售后保障:要求服务商提供校准认证报告(含原始数据),并承诺48小时内响应异常问题
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